大蒜等12种中草药的体外抑菌实验
本实验对辣椒水煎剂和大蒜乙醇制剂的抑菌性能加以研究,以期完善这两种保健调味品的抑菌性能研究。黄柏、蒲公英等常见中草药常用于微生物性传染病的治疗,也可用作防病饲料添加剂,但它们对常见病原菌的抗菌谱及抗菌浓度尚不明确,限制了它们在中医药和饲料添加剂方面的应用。在此,我们探讨了大蒜、辣椒、黄柏等12种药用植物提取物对大肠杆菌、副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌等常见病原菌的抗菌谱及最小抑菌浓度(MIC),希望能为它们的医药用途及生产应用提供科学依据。
1. 材料与仪器
1.1 菌株和培养基大肠杆菌、副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌为本实验室存留;大肠杆菌、副伤寒沙门氏菌和枯草杆菌培养基为营养琼脂No.3,金黄色葡萄球菌培养基为葡萄球菌琼脂110和营养琼脂No.3。
1.2 仪器垂直流超净工作台,DH3600A型电热恒温培养箱,手提式高压灭菌锅,2D-85型恒温振荡器,Labtech 8100型紫外可见分光光度计,ZD-85型恒温摇床,AB204-S基础型电子分析天平等。
1.3 中草药大蒜和辣椒购自农贸市场,其它中草药购自中药店。
2. 结果
2.1 涂布菌含量测定以上述方法测定了各病原菌涂布菌液浓度。大肠杆菌2.8×108/ml;副伤寒沙门氏菌1.1×108/ml;金黄色葡萄球菌4.1×108个/ml;枯草杆菌1.3×106个/ml。
2.2 大蒜提取物的抑菌结果从表1可以看出,大蒜乙醇提取物对副伤寒沙门氏菌和生长于葡萄球菌琼脂110上的金黄色葡萄球菌有抑制作用,MIC分别为6.25%和12.5%;在本研究浓度范围内对大肠杆菌和枯草杆菌无抑菌作用。
2.3 辣椒提取物的抑菌结果显示,辣椒浸提物对副伤寒沙门氏菌和生长于葡萄球菌琼脂110上的金黄色葡萄球菌有抑菌作用,MIC均为12.5%;对大肠杆菌和枯草杆菌未发现抑菌作用。辣椒提取物对病原菌的抑菌效果。
2.4 黄柏等中草药制剂抑菌结果黄柏、连翘等常见中草药的抗菌谱及最小抑菌浓度(MIC),其中黄芪、蒲公英、秦皮、乌梅、黄芩等中草药为对4种病原菌几乎都有抑菌作用,且抑菌作用较强,尤其是乌梅和秦皮对各种病原菌都有很强的抑菌作用。所选中草药中,只有青黛对4种病原菌均不抑制。表3黄柏等中草药对病原菌的最小抑菌浓度(MIC)% 。
2.5 培养基对中草药制剂抑制金黄色葡萄球菌效果的影响培养基对中草药抑菌效果有影响。可以看出,各类中草药制剂对葡萄球菌琼脂110上的金黄色葡萄球菌抑菌效果明显好于生长于营养琼脂No.3上的抑菌效果,其中大蒜、辣椒、秦皮、远志制剂对前者抑菌作用明显,而对后者没有抑菌作用;大黄、乌梅、黄芩等制剂对前者的抑菌效果也显著好于后者。这种抑菌效果的差异可以从金黄色葡萄球菌在两种培养基上的生长情况来说明,用两种培养基以平板计数法分别测定涂布菌液浓度,接种量完全相同,通过营养琼脂No.3测得菌液浓度为4.1×108个/ml,而用葡萄球菌琼脂110所得结果为3.1×108个/ml,说明营养琼脂No.3更适合金黄色葡萄球菌的生长,因而各类中草药对其上金黄色葡萄球菌抑菌效果略差一些,这与李仲兴等(2000)的结论一致。从另一角度也表明,培养基和涂布菌量对药敏纸片法中草药抑菌效果有较大影响。表4培养基对中草药抑制金黄色葡萄球菌效果的影响。